豬Ⅱ型肺泡細胞表面抗原(KL-6)試劑盒(ELISA)
操作步驟
-   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
 -   設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
 -   樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
 -   除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
 -   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
 -   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
 -   每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
 
 
實驗結(jié)果計算
以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。
 
試劑盒性能
-  檢測范圍:25 IU/mL – 800 IU/mL。
 -  靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 IU/mL。
 -  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。
 -  重復性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
 
試劑盒組成
 
名稱  | 96孔配置  | 48孔配置  | 備注  | 
微孔酶標板  | 8孔×12條  | 8孔×6條  | 無  | 
標準品  | 0.3mL*6管  | 0.3mL*6管  | 無  | 
樣本稀釋液  | 6mL  | 3mL  | 無  | 
檢測抗體-HRP  | 10mL  | 5mL  | 無  | 
20×洗滌緩沖液  | 25mL  | 15mL  | 按說明書進行稀釋  | 
底物A  | 6mL  | 3mL  | 無  | 
底物B  | 6mL  | 3mL  | 無  | 
終止液  | 6mL  | 3mL  | 無  | 
封板膜  | 2張  | 2張  | 無  | 
說明書  | 1份  | 1份  | 無  | 
自封袋  | 1個  | 1個  | 無  | 
備注:
1.  標準品濃度依次為:800、400、200、100、50、25 IU/mL
2.  經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。
 
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中豬Ⅱ型肺泡細胞表面抗原(KL-6)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
